Eukalyptusolje er eterisk olje fremstilt av bark og blad av forskjellige arter i planteslekten Eucalyptus, særlig av E. globulus.

Oljen utvinnes ved destillasjon med vanndamp og inneholder inn til 70 prosent eukalyptol, dessuten noen alkoholer og aldehyder av valeriana-, kapron- og smørsyre. De virksomme stoffene i oljen varierer mye fra art til art.

Eukalyptusolje brukes i medisin og folkemedisin. Eukalyptusolje har påvist antibakterielle egenskaper i flere studier, og brukes i for eksempel hostesaft og halspastiller.